细菌鉴定
北京睿博兴科生物技术有限公司
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基因合成FAQ

Q1:与传统PCR克隆相比,基因合成有什么优点?

A1:基因合成有如下优点:

· 密码子优化技术提高了蛋白的表达量及可溶性;

· 基因合成获得的基因无突变、准确,普通PCR产生非预期结果的可能性大,从而影响后续实验的进行;

· 不需要依赖模板以及酶切位点。

Q2睿博兴科基因合成服务的优势有哪些?

A2睿博兴科基因合成服务主要竞争优势:

· 可以合成任何基因,包括含重复序列、高GC含量、发夹结构、连续单一碱基重复等富含特殊结构的复杂基因;

· 密码子优化技术:提高了蛋白表达量及可溶性,促进蛋白正确折叠;

· 为客户提供具有竞争力的价格,帮助客户减少预算支出;

· 基因合成周期短

· 特有的安全制度保证客户的信息安全,公司严格按照与客户签定的基因合成服务协议和保密合同执行服务;

· 服务质量可靠,提供DNA测序结果,保证所合成的基因序列100%准确

Q3睿博兴科能合成多长的基因?

A3:睿博可为您合成小于5kb的基因序列,>60%GC含量或<40%GC含量的基因;重复片段基因。

Q4:密码子优化有必要吗?

A4:对于用于蛋白表达的基因来说,多数情况下是有必要的。如真核生物的基因需要在原核生物中表达。由于真核生物的密码子偏好和原核生物有很大不同,对基因进行密码子优化将显著提高表达效率。

Q5:如需密码子优化,我需要提供哪些信息?

A5:若需密码子优化,我们需要您提供如下信息:a.被优化的基因序列或者蛋白序列;b.优化的宿主;c.基因两端需添加的酶切位点或者基因内部需去除的酶切位点;d.是否需要特定的终止密码子;

Q6睿博兴科可以将合成的基因克隆至我指定的载体吗?

A6:可以。除pUC57topo,公司还有多个常用商业化载体,具体可发邮件进行咨询。客户自备的载体,需要您提供载体相关信息,我们会根据目的基因的长度收取相应的亚克隆费用。


Q7:基因合成服务提供的数据报告包含哪些文件,每个文件需要使用什么软件打开?

A7:您所收到的基因合成服务数据报告是压缩文件,可以使用Winrar4.0以上版本)打开,数据报告共含有4 类文件,分别为:

· Seq格式文件——根据您提供订单序列生成的目标序列文件,可以使用DNASTAR 软件打开;

· abiab1格式文件——测序彩图,可以使用Chromas 软件打开;

· gbk格式文件--合成后的全质粒序列,用snapgene打开

· word 格式文件——基因合成结果报告及QC文件。

Q8:如何使用睿博兴科基因合成交付的质粒及穿刺菌?

A8质粒使用方法:

· 所提供的质粒进行了真空冷冻干燥,干燥后的质粒呈薄膜状或粉末状附在离心管底部,使用前请先离心再小心开启,以免丢失;

· 标签上已注明质粒抽提的方式和质粒的量,对于正常订单,通常使用质粒小抽方法进行抽提,通过紫外分光光度计在260nm波长下进行定量。所供质粒保证OD260/OD2801.802.0之间,满足一般的分子生物学实验要求,如PCR 扩增、酶切、转化和测序等;

· 提供2-4μg冻干质粒DNA,建议用40μL灭菌后的双蒸水或10mM pH8.0 TE缓冲液来溶解,溶解后的质粒浓度100ng/μL。您也可以根据实验需要来溶解质粒;

· 溶解后的质粒请于-20℃保存,并请避免反复冻融。

穿刺菌使用方法:

· 穿刺菌请在4℃保存,保存周期建议为1周,最长不超过1个月;

· 您可以根据质粒的抗性来进行扩大培养,请用牙签、接种针或枪头在菌丝位置挑取一小块来扩大培养。